Как хранить пептиды: холодильник, морозилка, раствор

Коротко: сухой флакон с пептидом храните в холодильнике при 2–8 °C, в темноте; если нужно надолго — в морозилке при −20 °C. Разводят при комнатной температуре бактериостатической водой, пуская её по стенке флакона, и не встряхивают. Готовый раствор держат в холодильнике, а перед заморозкой делят на порции.

Большая часть неповторяемых результатов в работе с пептидами — следствие одной из двух ошибок. Первая: флакон хранили так, что пептид разрушился от тепла. Вторая: при разведении в раствор попали микробы или пептид получил «удар» кислотностью. Обе ошибки полностью предотвратимы. Ниже — как обращаться с флаконом, чтобы пептид оставался пригодным весь заявленный срок.

Что такое лиофилизат

Пептиды поставляют в виде лиофилизата. Это сухой порошок, из которого воду удалили вымораживанием: раствор замораживают, а затем лёд испаряют в вакууме. На дне флакона остаётся белая «таблетка» или рыхлый порошок. В сухом виде пептид намного стабильнее, чем в растворе. Поэтому сухой флакон спокойно переносит доставку при обычной температуре: холодовая цепь ему не нужна.

Как хранить сухой флакон

При правильном хранении сухой флакон стабилен весь срок, указанный в сертификате анализа. Правила простые:

• Обычное хранение: 2–8 °C, то есть обычный холодильник. Для длительного хранения — −20 °C или холоднее, подойдёт стандартная морозильная камера.
• Осторожно с морозилками no-frost. Они периодически оттаивают сами себя, и температура внутри скачет.
• До 30 дней большинство пептидов нормально переносит холодильник (2–8 °C). Но если в морозилке есть место, −20 °C лучше.
• Чего избегать: прямого света, влаги и частого перекладывания флакона из холода в тепло и обратно. Каждый выход в комнатную температуру отнимает у пептида дни срока годности. Открывайте флакон только рядом с осушителем — веществом, которое впитывает влагу.

Какие пептиды особенно чувствительны

Некоторые аминокислоты легко окисляются, то есть портятся от кислорода. Это метионин, цистеин и триптофан. Пептиды с ними лучше хранить, заполнив флакон инертным газом — аргоном или азотом, — если это практично. Ещё одна чувствительная группа — пептиды с дисульфидными мостиками, внутренними «скрепками» между двумя атомами серы (например, AOD-9604). Чтобы мостик остался целым, им нужен строгий контроль температуры.

Как развести пептид

Разведение (по-научному восстановление, или реконституция) — момент, когда риск загрязнения самый высокий за всю жизнь флакона. Порядок, который сводит риск к минимуму:

1. Дайте флакону и растворителю нагреться до комнатной температуры. Холодный растворитель на холодном лиофилизате растворяет его неравномерно, и в отдельных местах возникает «удар» кислотностью (pH-стресс).
2. Выберите растворитель. Если раствор будут хранить дольше 7 дней, берут бактериостатическую воду (BAC water): это стерильная вода с 0,9% бензилового спирта, который не даёт размножаться бактериям. Если всё нужно в тот же день, подойдёт стерильная вода без консерванта.
3. Пускайте растворитель по стенке флакона, а не прямо на таблетку лиофилизата. Прямая струя может вспенить пептид, и часть его потеряется.
4. Покачайте флакон мягкими круговыми движениями, не встряхивайте. Встряхивание разрушает чувствительные пептиды и распыляет их по стенкам.
5. Подождите 60–120 секунд, прежде чем набирать раствор. Большинство пептидов за это время растворяется полностью. Если через 5 минут видны частицы, флакон не используйте.

Подробнее о самой воде — в статье «Бактериостатическая вода: что это». Пошаговый разбор с расчётами — в руководстве по разведению.

Как посчитать концентрацию

На флаконе указана масса пептида, например 5 мг или 10 мг. Концентрация готового раствора зависит от того, сколько растворителя добавили. Концентрация — это сколько вещества приходится на один миллилитр:

Масса во флаконе	Объём растворителя	Концентрация раствора
5 мг	1 мл	5 мг/мл
5 мг	2 мл	2,5 мг/мл
10 мг	2 мл	5 мг/мл
10 мг	5 мл	2 мг/мл

Если важна точность, учитывайте содержание воды из сертификата анализа. Лиофилизат всегда удерживает немного воды. Флакон с надписью «5 мг» и 6% воды содержит 4,7 мг пептида и 0,3 мг связанной воды. Для большинства задач эта ошибка незначительна, для аналитической химии — нет.

Сколько хранится готовый раствор

• В холодильнике (2–8 °C) на бактериостатической воде: обычно 30–60 дней для большинства пептидов. Пептиды с метионином и цистеином ближе к нижней границе.
• В морозилке: большинство пептидов выдерживает одну заморозку и разморозку. Повторные циклы быстро разрушают пептид. Если раствор понадобится несколько раз, до заморозки разделите его на порции (аликвоты).
• При комнатной температуре: не дольше, чем идёт работа с раствором.
• Выбросьте раствор, если он помутнел, в нём появились частицы или он поменял цвет с прозрачного или бледного.

Чистота работы

Даже бактериостатическая вода не защищает от всех микробов. Протирайте резиновую пробку флакона изопропиловым спиртом перед каждым проколом иглой, каждый раз берите новую иглу и храните разведённый флакон стоя, с целым колпачком. Загрязнение — тихая переменная, которая портит все дальнейшие анализы.

Рекомендуемый объём растворителя для каждого соединения указан на его странице в каталоге.

Частые вопросы

Нужно ли держать сухой флакон в холодильнике сразу после доставки?

Да, так лучше. В дороге при обычной температуре лиофилизату ничего не грозит, но храниться он должен при 2–8 °C, а надолго — при −20 °C.

Подойдёт ли холодильник на кухне?

Да, обычный холодильник даёт нужные 2–8 °C. Держите флакон в коробке или в тёмном месте, подальше от двери, где температура скачет чаще.

Можно ли заморозить уже разведённый пептид?

Один раз — обычно да. Чтобы не размораживать весь раствор несколько раз, заранее разделите его на порции.

Чем бактериостатическая вода лучше обычной стерильной?

В ней есть 0,9% бензилового спирта, который не даёт размножаться бактериям. Поэтому раствор на ней можно хранить и использовать несколько раз. Стерильная вода без консерванта годится только на один день.

Как заказать

Все соединения и бактериостатическая вода — в каталоге. Бактериостатическая вода идёт в подарок к пептидам (одна бутылка на 1–3 флакона) и продаётся отдельно. Заказать можно на сайте или в Telegram-боте. Доставляем по Молдове за 1 рабочий день, оплата курьеру при получении. Перед доставкой мы звоним, чтобы подтвердить заказ.